养生专家2023年09月08日 02:06原创
1.凯氏定氮法:其是一种测定总氮含量的方法,可以在混合物或化合物中检测。即在催化剂条件下,用浓硫酸消化标本,将标本中的有机氮转化为无机铵盐,然后在碱性环境下将无机铵盐转化为氨,用蒸汽蒸馏吸收硼酸溶液,然后用标准盐酸滴定,计算氮含量。
2.双缩脲法:这是一种用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂呈蓝色,是一种碱性含铜测试溶液,它由几滴1%硫酸铜,1%氢氧化钾和酒石酸钾钠制成。
需要用到双缩脲试剂。
双缩脲试剂。它是一种碱性的含铜试液,呈蓝色,由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成。
可以通过双缩脲法进行检测。具体如下:
1.先取12支试管分为2组,分别在试管中加入0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升不等量的标准蛋白质溶液。再用水加入其中至1毫升,然后加入4毫升双缩脲试剂。
2.将试管内的溶液充分摇匀后,静置于20-25℃的室温下30分钟。再于波长540NM处进行测定各管吸光度值对比。
3.用没有加蛋白质溶液的试管作为空白对照液,再取两组测定的平均数值,以蛋白质含量为横坐标,以光吸收值为纵坐标绘制标准曲线。
4.取2~3个试管,重复相同方法,测定样品中蛋白质浓度。
1. 向试管注入2ml的待测组织样液2. 向试管内注入双缩脲试剂A液1ml, 摇匀3. 向试管内注入双缩脲试剂B液4滴, 摇匀4. 观察试管中出现的颜色变化..若出现紫色反应, 这证明含有蛋白质
检测蛋白质用双缩脲试剂检测。双缩脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一种碱性的含铜试液,呈蓝色,由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成。会遇到蛋白质显紫色。
蛋白质是组成人体一切细胞、组织的重要成分。机体所有重要的组成部分都需要有蛋白质的参与。一般说,蛋白质约占人体全部质量的18%,最重要的还是其与生命现象有关。
1、检验蛋白质所用试剂是双缩脲试剂。
2、蛋白质在双缩脲试剂的作用下,能产生紫色反应。
3、食物中是否含有蛋白质或蛋白质的含量多少,可用双缩脲试剂检测。在碱性溶液中,双缩脲试剂能与蛋白质反应,形成红褐色络合物。
4、由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键,因此,蛋白质中加入双缩脲试剂,震荡均匀,会观察到出现红褐色的现象。
蛋白质用双缩脲试剂检测。 双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制。会遇到蛋白质显紫色。 双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。
当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。
可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。
双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜,而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境,因此它可被其他碱,如氢氧化钠所代替。
向试剂中加入碘化钾,会延长试剂的使用寿命。
酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。
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