养生专家2023年09月18日 08:39原创
在 IHC 实验中,有几个会影响您实验结果的关键步骤。我们将重点关注抗体稀释液。
合适的抗体稀释液有多重要?
使用适合您的特定抗体的抗体稀释液,十分重要。稀释液 pH 值和离子强度的差异会增强或减弱抗体与靶标之间的特异性相互作用。此外,稀释液特性可能会影响与脱靶分子之间的非特异性相互作用,并且能影响抗体稳定性。理想的抗体稀释液支持抗体表位相互作用和特异性,最终支持您的染色强度。因此,当您的实验信号低时,可以先排查一下抗体稀释液是否合适。
添加血清蛋白作为稳定剂,并优化 pH 值,可克服上述问题。
如何找到特定抗体的抗体稀释液?
对于CST 经IHC实验验证的抗体,在相应产品页面的IHC 实验步骤部分,会推荐应搭配使用的稀释液。
SignalStain® 稀释液可用于所有 CST 抗体?
SignalStain® Antibody Diluent #8112 IHC抗体稀释液的确适合很多经过 IHC 验证的抗体,但它并非适合于每种抗体。对于某些经 IHC 验证的 CST 产品,使用 TBST + 5% normal goat serum等备选稀释液时,可能会获得更强的信号。详情请在相应产品的“实验步骤”中查找(如下图)。
如果使用了推荐稀释液以外的某种稀释液,会怎么样?
对于不同的一抗,情况有所不同。我们发现,某些 CST 抗体用不同的一抗稀释液稀释敏感性相似;但有些抗体对某种稀释液的敏感性会高于对其他稀释液的敏感性。
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